Rh血型系统目前共有47个抗原，其中最常见的主要有C，c，D，E，e5种。可分别用抗C、抗c、抗D、抗E、抗e这5种Rh定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是否存在相应抗原。在临床输血中，一般只做D抗原的鉴定。凡被检红细胞和抗D试剂凝集者为RhD阳性，不凝集者为RhD阴性。其他Rh抗原鉴定和D抗原一样，只是加相应的定型试剂即可。根据所选试剂的特性，RhD血型的鉴定方法可采用试管直接盐水凝集法，酶技术、抗人球蛋白技术、聚凝胺、微柱凝胶等。酶介质法：木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸，降低其表面电荷，从而减少红细胞之间的排斥力，使红细胞容易出现聚集，同时酶还可以部分地改变其表面结构，使某些抗原得以暴露，这样在相应的不完全抗体作用下，就可促进Rh血型系统的抗原与抗体反应，使红细胞发生凝集。在方法上又分为直接法和间接法。该方法的优点是直接法简便、经济、快速。间接法简单、经济比直接法敏感，既可鉴定抗原，也可检查抗体；缺点是直接法降低试验敏感性，间接法较费时、准确性和稳定性相对较差。低离子强度盐水凝液试验（lowionicstrengthsolutiontest，LIS）降低介质离子强度可减少细胞外围的阴离子，从而促进带正电荷的IgG与带负电荷的红细胞发生反应，增加红细胞凝集强度。该方法的优点是缩短反应时间，提高灵敏度。抗人球蛋白试验：又称Combs试验，在盐水介质中不完全抗体只能与相应的抗原的细胞结合（结合后称致敏红细胞），不产生凝集。使用抗球蛋白抗体后，抗球蛋白抗体与致敏红细胞表面的球蛋白相互发生特异性凝集反应。抗球蛋白试验又分为直接抗人球蛋白试验（directantiglobulintest，DAT）和间接抗人球蛋白试验（indirectantiglobulintest，IAT）。该方法的优点是结果准确可靠，检查不完全抗体最可靠方法；缺点是操作较复杂，费时、试剂较贵。凝聚胺试验（polybrenetest）：凝聚胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，溶解后产生正电荷，可中和红细胞表面带负电荷的唾液酸，减少细胞间的排斥力，使红细胞发生非特异凝集。正常红细胞可引起非特异性凝集为可逆性的，如果是抗体致敏红细胞被凝集成凝块，则是特异性的不可逆的凝集。该方法的优点是快速、灵敏、准确可靠；缺点是操作要求较高。人源盐水介质抗D试验：采用二硫苏糖醇等物质作为免疫球蛋白化学变性剂，处理来自人源的IgG类抗D血，使小分子IgG抗体转变成类似大分子的"IgM"抗体的作用，可用于Rh血型系统D抗原的快速检测。该方法的优点是简单、省时、结果特异、敏感、准确可靠，保存时间长；缺点是试剂较贵。