A . 28℃B . 50℃C . 42℃D . 56℃E . 65℃
退火温度一般是40~60℃之间,与PCR引物的GC含量有关,大多数情况下,引物为20个核苷酸左右,G+C含量约为50%的引物,55℃为最佳退火温度。
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